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病毒采樣管的科技含量
更新時(shí)間:2023-06-05   點(diǎn)擊次數(shù):2322次

近期國內(nèi)新冠疫情頻發(fā),防控形勢(shì)嚴(yán)峻。核酸檢測質(zhì)量對(duì)于疫情防控具有重要作用。目前病毒采樣管僅需I類醫(yī)療備案,產(chǎn)品魚龍混雜,招標(biāo)參數(shù)關(guān)注點(diǎn)浮于表面,往往集中在采樣管的材質(zhì)、 規(guī)格尺寸、是否為滅活采樣管等方面,忽視了更為關(guān)鍵的保存性能指標(biāo),為疫情的“動(dòng)態(tài)清零"和“精準(zhǔn)防控"增加了難度。

一、什么是病毒采樣管,作用是什么?

病毒采樣管是一類用于保存病毒樣本活性或維持樣本中核酸穩(wěn)定的一次性檢測耗材。

病毒采樣管一般由一次性采樣拭子、一次性病毒采樣管和生物安全袋三部分構(gòu)成。

病毒采樣管中的紅色液體是病毒保存液,分為滅活型和非滅活型兩種,根據(jù)《區(qū)域病毒核酸檢測組織實(shí)施指南(第三版)》中建議“人群篩查應(yīng)選擇具備病毒滅活功能,如含胍鹽(異硫氰酸胍或鹽酸胍等)或表面活性劑的采樣管"。它的優(yōu)點(diǎn)是能夠迅速滅活拭子當(dāng)中的病du, 防止檢測中出現(xiàn)交叉感染,同時(shí)能夠抑制核酸酶的活性,維持病毒核酸的穩(wěn)定。

二、拭子的科技含量與性能指標(biāo)

一次性采樣拭子的是利用植絨技術(shù),將尼龍絨毛垂直噴射在涂有膠水的ABS桿上制成的??梢酝暾?、快速將采集患者病灶處的上皮脫落細(xì)胞脫離釋放到保存液中,用于病毒檢測。

(一)尼龍植絨拭子優(yōu)勢(shì)

高吸附:尼龍植絨拭子的“吸附"效率比其他拭子高20%~60%。

快采集:植絨尼龍拭子僅需3秒~11秒即可吸收采集樣品;而棉質(zhì)拭子的取樣時(shí)間長達(dá)15秒~120秒。

高釋放:國內(nèi)一項(xiàng)病原體的采集實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),植絨尼龍拭子對(duì)病原體的采集后釋放效率,在不同稀釋濃度下都幾乎與無拭子陽性對(duì)照組相近;而棉質(zhì)拭子的病原體采集后釋放效率明顯偏低,且結(jié)果受稀釋濃度影響更大。

(二)拭子對(duì)人體的安全性

疫情常態(tài)化監(jiān)測使核酸大篩成為生活日常,一周三檢、四檢,甚至一些服務(wù)行業(yè)人員需要每天進(jìn)行核酸檢測,拭子需要直接接觸口腔和鼻腔粘膜,因此安全性不容忽視。

ISO10993-10:2010醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)分別從細(xì)胞毒性、皮膚刺激性和皮膚致敏性三個(gè)維度,對(duì)采樣拭子的生物安全性進(jìn)行評(píng)估,幫助我們挑選對(duì)人體安全的采樣拭子。

三、病毒采樣管的技術(shù)指標(biāo)

病毒采樣管保存的拭子樣本,需要送到分子實(shí)驗(yàn)室做核酸檢測,由于病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,性質(zhì)極其不穩(wěn)定,溫度太高容易降解,隨處可見的核酸酶也會(huì)導(dǎo)致其降解,因此采樣管能否穩(wěn)定保存病毒的RNA,成為核酸檢測準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。

采樣管質(zhì)量的好壞,除了“看的見"的指標(biāo),更重要的是“看不見"的指標(biāo)?!翱吹囊?的指標(biāo)包括采樣管材質(zhì)、工藝水平、密封性,灌裝準(zhǔn)確度等直接觀察的質(zhì)量指標(biāo)。“看不見"的指標(biāo)則包括了病毒核酸的保存效果、檢測限保存效果、微生物指標(biāo)、病毒滅活效率等方面,這些指標(biāo)才是決定病毒核酸檢測的關(guān)鍵。

關(guān)鍵指標(biāo)1:病毒核酸的保存效果

病毒在保存管中被滅活,釋放出遺傳物質(zhì)RNA,單鏈RNA在體外極其不穩(wěn)定,極其容易發(fā)生降解和水解作用,病毒保存液的作用就是維持病毒RNA的完整,抑制降解和水解。溫度、運(yùn)輸條件、保存天數(shù)都會(huì)都對(duì)RNA的完整性產(chǎn)生影響。RNA保護(hù)的越好,病毒的核酸檢測越準(zhǔn)確。

不同病毒采樣管的保存性能差異很大,上圖A和D兩品牌采樣管分別測試4℃、25℃和37℃保存病毒24小時(shí)的核酸檢測結(jié)果,A保存管ct值與剛采樣時(shí)的ct值幾乎無變化,說明保存效果較好,而D保存管,自第4小時(shí)起,已無法檢出病毒核酸。


關(guān)鍵指標(biāo)2:檢測限保存效果

該項(xiàng)指標(biāo)目的是為了確保低病毒載量的樣本檢的出,不發(fā)生假陰性誤判。

國家要求新冠檢測靈敏度不高于500拷貝/ml,換言之,只要樣本濃度不低于500拷貝/ml,就應(yīng)該被檢測到。而現(xiàn)實(shí)情況是,在大規(guī)模人群篩查,或者偏遠(yuǎn)地區(qū)核酸采樣后,樣本并不能立即送到實(shí)驗(yàn)室檢測,原本病毒載量比較低的樣本,有可能RNA降解比較嚴(yán)重,降至500拷貝/ml濃度以下,因此出現(xiàn)漏檢,即假陰性檢測結(jié)果。

關(guān)鍵指標(biāo)3:微生物指標(biāo)

病毒采樣管應(yīng)采用一次性無毒包裝、輻射滅活工藝制造。達(dá)到“需氧菌總數(shù)(CFU/mL)≤200; 霉菌和酵母菌總數(shù)(CFU/mL)  ≤ 100"的要求。

病毒采樣管中的液體為病毒保存液,其中添加了顏色指示劑酚紅。正常情況下,液體應(yīng)為偏堿性,顏色為紫紅色。一旦采樣管微生物不達(dá)標(biāo),其繁殖會(huì)導(dǎo)致液體pH值下降,保存液由紅轉(zhuǎn)黃,可以通過管子液體顏色,直觀判斷微生物是否達(dá)標(biāo)。微生物的存在會(huì)加速病毒RNA的降解,影響核酸檢測的靈敏度。


關(guān)鍵指標(biāo)4:病毒滅活效率


根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)病毒核酸檢測工作手冊(cè) (試行第二版) 》 通知,“人群篩查應(yīng)選擇具備病毒滅活功能,如含胍鹽 (異硫氰酸胍或鹽酸胍等) 或表面活性劑的采樣管,抗疫一線非常需要能直接滅活病毒的樣本保存液,這樣可以大大提高樣本采集、運(yùn)輸過程中的安全性。應(yīng)具備高效的病毒滅活效率,如下表所示,該病毒保存管可在 1min 達(dá)到 99.99% 的病毒滅活效率。

結(jié)語

面對(duì)巨大的檢測需求和市場,勢(shì)必會(huì)出現(xiàn)良莠不齊的產(chǎn)品,但在關(guān)乎國計(jì)民生的新冠核酸篩查領(lǐng)域,產(chǎn)品質(zhì)量比價(jià)格更為重要,要堅(jiān)持品質(zhì)至上的原則,確保核酸檢測的準(zhǔn)確性,不要因小失大。


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